産(chǎn)品中(zhōng)心

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産(chǎn)品分(fēn)類

CM-Crystarose-High-Performance

所屬分(fēn)類：瓊脂糖填料

采用(yòng)平均粒徑為(wèi)90um的多(duō)孔型瓊脂糖通過化學(xué)鍵合弱陽離子功能(néng)配基形成...

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　　産(chǎn)品名(míng)稱：CM-Crystarose High Performance

　　CM 瓊脂糖凝膠 HP

　　一、簡介

　　CM- Crystarose Fast Flow是弱陽離子交換層析填料，它采用(yòng)平均粒徑為(wèi)90um的多(duō)孔型瓊脂糖通過化學(xué)鍵合弱陽離子功能(néng)配基形成，配基如下：

　　-O-CH2COO-

　　其具(jù)有(yǒu)更高的比表面積和更好的生物(wù)兼容性，它再高流速下保持更高載量，同時又(yòu)具(jù)有(yǒu)很(hěn)高的分(fēn)辨率。由于比表面積大，平衡和洗脫的時間也更短。

　　本産(chǎn)品特點：流速快、剛性強、載量高、物(wù)化穩定性好、壽命長(cháng)、重複性好;容易放大。

　　二、産(chǎn)品技(jì )術指标：

　　測試壞境：柱内徑5cm,高度15cm,壓力1bar

　　三、應用(yòng)的注意事項：

　　1)色譜柱填裝(zhuāng)

　　1、柱子裝(zhuāng)填前應在柱子下端加入小(xiǎo)量的緩沖溶液，排出柱子内部的氣泡，關閉柱子出口，在柱内保留少量的緩沖溶液。可(kě)以在裏面加少許吐溫避免氣泡産(chǎn)生，也可(kě)以換成純水裝(zhuāng)柱子。在裝(zhuāng)柱之前可(kě)用(yòng)抽濾漏鬥将膠用(yòng)緩沖液或者純淨水抽洗3-5倍膠體(tǐ)積。

　　2、将填料倒入層析柱中(zhōng)，必要時可(kě)用(yòng)玻璃棒緊靠柱子内壁引流，以減少氣泡的産(chǎn)生，可(kě)讓填料自然沉降，也可(kě)以裝(zhuāng)柱的過程中(zhōng)可(kě)以施加一定的壓力加快裝(zhuāng)柱的速度，可(kě)以提高一定的柱效。注意在層析過程中(zhōng)的層析的更大流速要小(xiǎo)于裝(zhuāng)柱時的流速。

　　3、在柱子裝(zhuāng)填前，填料從冰箱中(zhōng)取出後應在室溫環境中(zhōng)放置 1-3 個小(xiǎo)時，使之填料溫度與環境溫度保持一緻，這樣可(kě)以避免柱子裝(zhuāng)填時由于溫度劇烈變化産(chǎn)生大量氣泡，從而影響柱效。

　　2) 蛋白的結合

　　樣品的鹽濃度和 pH 要盡量和平衡柱子的緩沖液一緻，鹽濃度過高或者 pH 過高都有(yǒu)可(kě)能(néng)影響結合挂柱效果，所以要根據自己的樣品做适當調整。

　　3) 蛋白的洗脫

　　1、離子交換一般是低鹽吸附高鹽洗脫。如果采用(yòng)線(xiàn)性梯度洗脫，上樣量應控制在柱填料總載量的10%或更低，上樣量低，可(kě)以有(yǒu)效提高分(fēn)離效果，樣品濃度不宜過高。如果采用(yòng)階段洗脫的方法，上樣量可(kě)以控制在柱總載量30%左右。階段洗脫相對更容易放大，重複性好。離子交換層析柱子裝(zhuāng)填高度一般不超過30cm,要增加柱子規模隻增加柱子直徑便可(kě)。線(xiàn)性梯度洗脫和階段洗脫方法各有(yǒu)優缺點，一般線(xiàn)性梯度洗脫方法适合摸索洗脫條件，而階段洗脫适合大規模純化。

　　四、再生、清洗

　　五、層析柱用(yòng)完後用(yòng) 0.2-0.5M NaOH (可(kě)添加1M NaCl)、DH?2O和0.1-0.2M HCL循環清洗 3-5 個床體(tǐ)積，再用(yòng)1M NaCL平衡至PH中(zhōng)性用(yòng)純水和20%各沖洗3個柱床體(tǐ)積後保存。步驟：先用(yòng)NaOH清洗3-5個柱體(tǐ)積，再用(yòng)水洗3--5 個柱床體(tǐ)積，然後再用(yòng)HCL清洗3---5個柱體(tǐ)積。如果遇到頑固的物(wù)質(zhì)用(yòng)上述方法無法洗脫的話，可(kě)以在清洗液中(zhōng)加入适當的去污劑，液可(kě)以直接用(yòng)6M鹽酸胍或者8M尿素清洗柱子。然後 20%的乙醇流洗 5 個柱床體(tǐ)積并保存。

　　六、保存

　　在 20%乙醇中(zhōng)，4℃下長(cháng)期保存。

關鍵詞：

Crystarose-High-Performance

瓊脂糖凝膠

CH2COO

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