産(chǎn)品分(fēn)類
微量離心式脫鹽預裝(zhuāng)柱
所屬分(fēn)類:凝膠過濾層析預裝(zhuāng)柱
用(yòng)于50-150ul樣品脫鹽,隻需要一台小(xiǎo)型離心機即可(kě),5分(fēn)鍾内即可(kě)完成脫鹽
Spin DS G-25脫鹽柱
離心式脫鹽柱
1 Spin DS G-25脫鹽柱簡介
Spin DS G-25脫鹽柱是便捷的手動脫鹽柱,操作(zuò)借用(yòng)離心機快速完成,可(kě)以将生物(wù)大分(fēn)子從小(xiǎo)分(fēn)子鹽中(zhōng)分(fēn)離處理(lǐ),還可(kě)以交換緩沖溶液和樣品清洗。小(xiǎo)分(fēn)子如各種化學(xué)物(wù)質(zhì)鹽,遊離标簽等可(kě)以有(yǒu)效的從大分(fēn)子物(wù)質(zhì)去除。脫鹽效率高,方便快捷。該預裝(zhuāng)柱内含0.6ml Crystadex G-25填料(中(zhōng)),其孔徑排阻極限為(wèi)5000,分(fēn)子小(xiǎo)于孔徑的則會進入到凝膠孔内,起整個路徑是整個凝膠體(tǐ)積;分(fēn)子大于孔徑的則不會進入凝膠孔内,隻在凝膠的外水體(tǐ)積中(zhōng)流過,所以,大分(fēn)子會較小(xiǎo)分(fēn)子先流出。
2 操作(zuò)步驟:
-
- DS Spin G-25脫鹽柱準備
打開脫鹽柱上下蓋,套上收集管或者合适套管,放到合适的離心機上800g離心力離心1分(fēn)鍾
-
- 平衡
加入400ul平衡緩沖溶液,800g離心2-3分(fēn)鍾,重複3-4次。
-
- 加樣品
将脫鹽柱放在合适的架子上,加入140ul樣品到脫鹽柱裏,等到樣品慢慢進入柱中(zhōng)。如樣品不足140ul,在樣品完全進入膠裏後,補加平衡液到140ul,直到完全進入膠裏。
-
- 洗脫
加入250ul洗脫緩沖溶液,800g離心2-3分(fēn)鍾進行洗脫,收集洗脫液。
注:如果為(wèi)了減少洗脫體(tǐ)積,可(kě)以在洗脫前先加入40ul溶液,等溶液完全進入膠裏後,在加200ul洗脫溶液,洗脫一次。
注意:離心洗脫時不要蓋蓋子。
3步驟原理(lǐ)
3.1平衡:
3.1.1平衡之前需要打開上下蓋帽,平衡柱以去除儲存溶液是至關重要的。穩定劑在柱中(zhōng)也需要去除,所以我們還需要加入緩沖液平衡。
-
-
- 平衡可(kě)以每次添加400ul溶液進行離心,總共平衡2-3個柱體(tǐ)積。
-
3.2 樣品應用(yòng)
3.2.1 每次樣品負載100~160 ul樣品。
3.2.2 對于較大的樣本體(tǐ)積(或大量的樣本),考慮使用(yòng)更合适的預裝(zhuāng)柱規格,見表1。
3.2.3 對于小(xiǎo)于140微升的樣品體(tǐ)積,建議在樣品已完全吸收後(樣品進入膠裏)添加平衡緩沖液使體(tǐ)積達到140ul,
-
- 離心
3.3.1離心需要在800g離心力下離心。
3.3.2 記住在第一次離心之時柱子蓋子的方向,在後面所有(yǒu)的離心中(zhōng)蓋子的朝向保持完全一緻。因為(wèi)離心會讓柱子一邊高于另為(wèi)一邊。
3.3..3 每一次離心結束後都要清空收集管。
3.4樣品回收
3.4.1 樣品的回收率取決于蛋白質(zhì)或其他(tā)生物(wù)大分(fēn)子。通常情況下,回收率在70—90%範圍内。
-
-
- 樣品濃度的增加可(kě)以提高回收率。
-
3.4.3 增加樣品體(tǐ)積和收集體(tǐ)積可(kě)以提高回收率。
警告:本産(chǎn)品僅供研究使用(yòng)。
所有(yǒu)的化學(xué)品都被認為(wèi)是有(yǒu)潛在危險的,所以,使用(yòng)該産(chǎn)品的人員應該是受過專業訓練的專業人員,需要佩戴實驗室工(gōng)作(zuò)服,眼睛和手套。應避免皮膚和眼睛接觸,如有(yǒu)接觸,請立即用(yòng)清水清洗。詳情請看說明書。
關鍵詞: